激發(fā)波長(cháng)和發(fā)射波長(cháng)是熒光檢測器檢測熒光的必要參數

　　熒光檢測器的特性，使光源的能量分布、單色器的透射率和檢測器的響應等性能會(huì )隨波長(cháng)而變，所以同一化合物在不同的儀器上會(huì )得到不同的光譜圖，且彼此間無(wú)類(lèi)比性，這種光譜稱(chēng)為表觀(guān)光譜。要使同一化合物在不同的儀器上能得到具有相同特性的熒光光譜，則需要對儀器的上述特性進(jìn)行校正。經(jīng)過(guò)校正的光譜稱(chēng)為真正的熒光光譜。

　　激發(fā)波長(cháng)和發(fā)射波長(cháng)是熒光檢測的必要參數。選擇合適的激發(fā)波長(cháng)和發(fā)射波長(cháng)，對檢測的靈敏度和選擇性都重要，尤其是可以較大程度地提檢測靈敏度。

　　熒光屬于光致發(fā)光，需選擇合適的激發(fā)光波長(cháng)(Ex)以利于檢測。激發(fā)波長(cháng)可通過(guò)熒光化合物的激發(fā)光譜來(lái)確定。激發(fā)光譜的具體檢測辦法是通過(guò)掃描激發(fā)單色器，使不同波長(cháng)的入射光激發(fā)熒光化合物，產(chǎn)生的熒光通過(guò)固定波長(cháng)的發(fā)射單色器，由光檢測元件檢測。zui終得到熒光度對激發(fā)波長(cháng)的關(guān)系曲線(xiàn)就是激發(fā)光譜。在激發(fā)光譜曲線(xiàn)的zui大波長(cháng)處，處于激發(fā)態(tài)的分子數目zui多，即所吸收的光能量也zui多，能產(chǎn)生zui的熒光。當考慮靈敏度時(shí)，測定應選擇zui大激發(fā)波長(cháng)。

　　一般所說(shuō)的熒光光譜，實(shí)際上僅指熒光發(fā)射光譜。它是在激發(fā)單色器波長(cháng)固定時(shí)，發(fā)射單色器進(jìn)行波長(cháng)掃描所得的熒光度隨熒光波長(cháng)(即發(fā)射波長(cháng)，Em)變化的曲線(xiàn)。熒光光譜可供鑒別熒光物質(zhì)，并作為熒光測定時(shí)選擇合適的測定波長(cháng)的依據。