液相色譜儀的原理是利用不同待分離物質(zhì)在兩相中的親和力差異，如分配系數、吸附容量等。利用外力，含有樣品的流動(dòng)相(氣體、液體)通過(guò)固定在柱或平板上的固定相表面，該固定相與流動(dòng)不相溶。當流動(dòng)相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時(shí)，混合物中的組分與固定相相互作用。

　　液相色譜法只要求樣品能制成溶液，不受樣品揮發(fā)性的限制，流動(dòng)相可選擇的范圍寬，固定相的種類(lèi)繁多，因而可以分離熱不穩定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。與試樣預處理技術(shù)相配合，HPLC所達到的分辨率和靈敏度，使分離和同時(shí)測定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì)成為可能，能夠分離復雜相體中的微量成分。隨著(zhù)固定相的發(fā)展，有可能在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成其分離HPLC成為解決生化分析問(wèn)題zui有前途的方法。由于HPLC具有分辨率、靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用，流出組分易收集等點(diǎn)，因而被應用到生物化學(xué)、食品分析、醫藥研究、環(huán)境分析、無(wú)機分析等各種領(lǐng)域。液相色譜儀與結構儀器的聯(lián)用是一個(gè)重要的發(fā)展方向。液相色譜-質(zhì)譜連用技術(shù)受到普遍重視，如分析氨基甲酸酯農藥和多核芳烴等；液相色譜-紅外光譜連用也發(fā)展快如在環(huán)境污染分析測定水中的烴類(lèi)，海水中的不揮發(fā)烴類(lèi)，使環(huán)境污染分析得到的發(fā)展。

　　為了液相色譜儀使用的穩定性，我們對于設備使用環(huán)境是有一定要求的，包括：通風(fēng)、照明、供電、環(huán)境溫度和濕度以及潔凈度，其中：

　　1、通風(fēng)：使用液相色譜儀分析過(guò)程中，由于流動(dòng)相中含有揮發(fā)性有機溶劑（甲醇、乙睛等）會(huì )產(chǎn)生有害氣體，對儀器中的光學(xué)元件帶來(lái)腐蝕，應注意儀器室的通風(fēng)，以排除室內有害氣體、保持空氣清。通風(fēng)主要有兩種方式：一種自然通風(fēng)，定時(shí)打開(kāi)門(mén)窗，讓內外空氣對流;另一種是制通風(fēng)，如用通風(fēng)柜、排風(fēng)扇等，及時(shí)將有害氣體排出室外。

　　2、照明：室內照明要光線(xiàn)適中，避免陽(yáng)光直射。為避開(kāi)直射光線(xiàn)對儀器操作、觀(guān)測的影響，儀器(顯示屏)應側向光線(xiàn)。實(shí)驗室窗戶(hù)要掛窗簾，以便隨時(shí)調節光照度。

　　3、供電：液相色譜室應設有照明電源和動(dòng)力電源，動(dòng)力電可供儀器運行使用。為減少噪音的干擾，儀器應遠離瞬時(shí)供電的大功率電器設備，如大型電動(dòng)設備、電梯、空調系統等。為HPLC泵的晶度，必須要穩定的輸人電壓，為此，建議色譜室應設有和儀器負荷相當的穩壓電源。

　　4、環(huán)境溫度和濕度：適宜的溫度和濕度是保障HPLC儀正常運行、性能穩定的必要條件。一般要求室溫在20一30℃之間，日溫度變化2一3℃，不要波動(dòng)太大，否則，在開(kāi)機分析時(shí)會(huì )影響色譜分離，夏季一定要控制室溫不要過(guò)30℃，溫度太會(huì )使流路系統產(chǎn)生氣泡，影響檢測器的正常工作（如熒光檢測器）。室內相對濕度應控制在60%以下。

　　5、潔凈度：懸浮于空氣中的顆粒物質(zhì)會(huì )對色譜儀器分析帶來(lái)干擾，使本底和噪聲升，成為分析測試的污染源，直接影響純物質(zhì)的純度與痕量雜質(zhì)的分析。