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對色譜柱柱效值進(jìn)行跟蹤測算應注意的問(wèn)題
點(diǎn)擊次數:1208 發(fā)布時(shí)間:2020-05-26
對色譜柱柱效值進(jìn)行跟蹤測算應注意的問(wèn)題
我們也應記住柱效值并不足以預測在條件下的柱性能,對大多數色譜工作者來(lái)說(shuō),柱性能指的是色譜柱用于特定分離的能力,而僅僅有柱效并不能這種分離能力。
不管用什么特定的測試方法,都會(huì )有幾個(gè)參數影響柱效的測定。這些參數包括:洗脫液的成分和粘度及其線(xiàn)流速,測定塔板數所用的溶質(zhì),溫度,柱長(cháng),填料裝填方式,顆粒度,還有所選用的測量和計算方法。而測量和計算方法對柱效值的確定起著(zhù)大的作用。
幾種測量和計算柱效值的方法
因為色譜峰是假定樣品濃度在移動(dòng)相和固定相中呈正態(tài)分布而得到的樣品譜帶分布,故常常把色譜峰型看作正態(tài)曲線(xiàn)來(lái)計算理論塔板數。因此計算柱效(以理論塔板數n為單位)的公式習慣上定義為:
式中tR為色譜峰的保留時(shí)間;σ2是以時(shí)間為單位測量色譜峰的偏差;a是和峰(從測峰寬的基線(xiàn)量起)有關(guān)的常數,ωb是峰寬,表示由色譜峰頂點(diǎn)與色譜峰兩側拐點(diǎn)處做切線(xiàn)與峰底基線(xiàn)相交兩點(diǎn)間的距離。
假如一個(gè)色譜峰真是正態(tài)峰型,那么每種計算方法都會(huì )得到同樣的結果。然而即使一些比較理想的儀器和傾向于得到對稱(chēng)峰型的溶質(zhì),由于柱內的槽或空隙,也會(huì )出現非正態(tài)峰型。所以不同的計算方法將會(huì )得到相差較大的n值。通常偏離正態(tài)模型的峰型表示為“前延”或“拖尾”。對于這些峰型,越在峰的處測量,計算的理論塔板數值就越大(性越低)。在許多情況下,色譜工作者需要能反映整個(gè)峰型(包括拖尾)的柱效值,同時(shí)為了定量的重復性,也需要色譜峰好的對稱(chēng)性。這時(shí)對色譜峰非對稱(chēng)性***敏感的計算方法***適合。如果目的僅僅是要監測色譜柱從******次使用到使用壽命結束這一過(guò)程中的柱效,那么以上任何一種方法都可以,應選擇***簡(jiǎn)便的方法。